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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;BT-549BT549
 
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產(chǎn)品名稱:
乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;BT-549BT549
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;BT-549[BT549]相關(guān)產(chǎn)品:
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  乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;BT-549BT549的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

貨號(hào)

乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;BT-549[BT549]

貼壁生長(zhǎng)

EY-X63835

細(xì)胞名稱  乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;BT-549[BT549]
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 該細(xì)胞1978年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系,源自一位72歲患有乳腺導(dǎo)管癌的白人女性,來源組織包括及浸潤(rùn)導(dǎo)管。該細(xì)胞形態(tài)包括上皮樣細(xì)胞及多核巨細(xì)胞,可分泌一種粘性物質(zhì)。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;0.023IU/mlinsulin

傳代方法: 1:2~1:6傳代,2~3天換液一次

傳代情況: P48

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
圍脂滴蛋白1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 胚腎二倍體細(xì)胞;HEK-2形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Recombinant Perilipin 1

腎上腺升壓素檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: EB病轉(zhuǎn)化的B淋巴細(xì)胞(彝族);KM934形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Automatic Data Translator

血小板抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 細(xì)胞;HeLa形態(tài)特性: 上皮樣platelet antibody

WNT1可誘導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑蛋白2檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠耳蝠皮膚細(xì)胞;BMS2形態(tài)特性: 成纖維樣細(xì)胞WISP2

大內(nèi)皮素1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 大蹄蝠皮膚細(xì)胞;GRBS1形態(tài)特性: 成纖維樣細(xì)胞Big Endothelin 1

骨膜素抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Periostin antibody

合胞素1檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 西南鼠耳蝠皮膚細(xì)胞;SMS1形態(tài)特性: 成纖維樣細(xì)胞syncytin-1

反應(yīng)蛋白7A域受體抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 慢性髓系白血病細(xì)胞;K562形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣;圓形Thrombospondin type-1 domain-containing protein 7A receptor antibody

難辨梭狀芽孢桿菌素A檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: EB病轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM932形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣clostridium difficile Toxin A

產(chǎn)細(xì)胞素幽門螺桿菌抗體IGG檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 胰腺癌細(xì)胞;PANC-1形態(tài)特性: 上皮樣HP-IgG

傷寒IgM抗體檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 犬蝠肺細(xì)胞;GSnFBL2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣St IgM-Ab

跨膜蛋白97檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 三葉小蹄蝠皮膚細(xì)胞;STBS2形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Transmembrane protein 97

胖素檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29形態(tài)特性: 上皮樣;多角orexins

1,3-丙二醇檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 犬蝠皮膚細(xì)胞;GSnFBS1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣1,3-propanediol

1,2-丙二醇檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 腦多型膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BT-325形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣1,2-propanediol

甲醛血清白蛋白結(jié)合物檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-L1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Formaldehyde albumin conjugate

Tafazzin蛋白檢測(cè)試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠肺細(xì)胞;MML1形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Recombinant Tafazzin
乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞;BT-549[BT549]化鈉三糖鐵生化管規(guī)格:10支/盒用途:用于副溶血性弧菌的生化鑒定(SN)。

粘液鹽(質(zhì)控肉湯)規(guī)格:10支/盒用途:用于志賀氏菌的生化鑒定。

乳菌生化鑒定試劑盒規(guī)格:8支/盒用途:用于乳菌的生化鑒定。

吲哚生化管規(guī)格:10支/盒用途:用于沙門氏菌的生化鑒定(SN)。

安潔清1號(hào)實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿洗滌劑規(guī)格:10L/桶用途:用于實(shí)驗(yàn)室玻璃器皿的輕、重度污染物的清洗

水楊苷發(fā)酵管b規(guī)格:10支/盒用途:用于乳桿菌的生化鑒定。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞 BT-549[BT549]
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