公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild | 貼壁生長 | EY-X63654 |
細胞名稱 犬腎細胞系/野生型;MDCK/wild
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系源自一只雌性英國可卡犬的腎臟組織,由S.H.MadinandN.B.Darby于1958年建立。該細胞為角蛋白陽性細胞。
培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C7
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Picrasidine A
CAS No.:82652-20-8
中文名:
分子式:C27H22N4O3
假荊芥屬苷;Nepitrin 訂購|咨詢 鈣黏蛋白18(CDH18) 規格: 20mg
基黃連;Worenine chlor 訂購|咨詢 鈣黏蛋白19(CDH19) 規格: 20mg
紅松內酯;Pinusolide 訂購|咨詢 鈣黏蛋白20(CDH20) 規格: 20mg
黃杞苷;Emgelitin 訂購|咨詢 鈣黏蛋白22(CDH22) 規格: 20mg
枸橘苷;Poncirin 訂購|咨詢 鈣黏蛋白23(CDH23) 規格: 20mg
番茄紅素;Lycopene 訂購|咨詢 鈣黏蛋白24(CDH24) 規格: 20mg
冬凌草素;Ponicidin 訂購|咨詢 鈣黏蛋白26(CDH26) 規格: 10mg
大麥芽;Hordenine 訂購|咨詢 鈣黏蛋白7(CDH7) 規格: 20mg
草質素苷;Rhodionin;Herba 訂購|咨詢 鈣黏蛋白8(CDH8) 規格: 20mg
長梗冬青苷;Pedunculoside 訂購|咨詢 鈣黏蛋白9(CDH9) 規格: 20mg
白蠟樹精;Fraxil 訂購|咨詢 /氫交換因子1(NHE1) 規格: 20mg
L薄荷;LMenthol 訂購|咨詢 //鈣交換因子1(NCKX1) 規格: 20mg
格洛苷C;Angoroside C 訂購|咨詢 //鈣交換因子2(NCKX2) 規格: 20mg
磺間氧;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 /離子轉運ATP酶α1肽(ATP1α1) 規格: 0.1g
亞;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 /離子轉運ATP酶α2肽(ATP1α2) 規格: 0.1g
撲草凈;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 /離子轉運ATP酶β1肽(ATP1β1) 規格: 0.1g
酰草;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 /離子轉運ATP酶β1肽(ATP1β1) 規格: 0.1g
草;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 /離子轉運ATP酶β3肽(ATP1β3) 規格: 0.1g
DDIT4L DNA損傷誘導轉錄樣蛋白4抗體 現貨供應 0.2ml Oxybutynin HCl
DEAF1/Deformed Epidermal Autoregulatory Factor 1 畸形表皮自調節因子1抗體 現貨供應 0.2ml Oxybutynin HCl
EID3 E1A樣分抑制因子3抗體 現貨供應 0.2ml Paroxetine HCl
ERCC6L 發育相關蛋白ERCC6L抗體(致畸因子) 現貨供應 0.2ml Paroxetine HCl
FAM107A 腎細胞癌下調蛋白1抗體 現貨供應 0.2ml Piroxicam
FRK/PTK5 胃腸道相關酪激酶抗體(蛋白酪激酶5) 現貨供應 0.2ml Piroxicam
GANP 生發中心相關核蛋白MCM3抗體 現貨供應 0.2ml Posaconazole
GIDRP88 生長抑制和分相關蛋白抗體 現貨供應 0.2ml Posaconazole
櫟精 進口、國產 英文名稱:Quercetin 含量:BR,99%
進口、國產 英文名稱:Furazolidone 含量:BR
聯大茴香 進口、國產 英文名稱:3,3'Dimethoxybenzidine 含量:BR,4%
聯大茴香 進口、國產 英文名稱:oDianisidinedihydrochloride 含量:高純,98%
鏈酶親和素 進口、國產 英文名稱:Streptavidin 含量:生物技術級,10u/mg
鏈霉菌屬十字孢 進口、國產 英文名稱:StaurosporinefromStreptomycessp. 含量:USP級,99%
鏈脲 進口、國產 英文名稱:Streptozotocin 含量:BR,9600%
鏈球菌纖溶酶 進口、國產 英文名稱:Streptokinaserecombinant 含量:高純,30u/mg
鏈絲菌蛋白酶 進口、國產 英文名稱:PronaseE 含量:BR,300u/mg
兩性 進口、國產 英文名稱:AmphotericinB 含量:BR,90%
犬腎細胞系/野生型;MDCK/wildPPLO瓊脂規格:250g用途:用于支原體分離和培養的基礎培養基
衛矛醇半固體規格:20支詳情介紹
木糖賴氨脫氧膽鹽瓊脂對照培養基規格:11.0g/200mL,30袋/盒用途:培養基適用性實驗
LG培養基規格:250g用途:用于霉菌、酵母菌、耐熱霉菌及細菌總數的檢測,可用于PET瓶及無菌罐裝線的無菌驗證。
亞碲鉀血瓊脂基礎規格:250g用途:用于白喉桿菌的分離培養
SC瓊脂基礎規格:50%卵黃乳液用途:5ml
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。