產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
偶發(fā)分枝桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Mycobacterium fortuitum | EY00P9123 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
溴芬酸鈉3-O-乙酰基-16α-羥基松苓新酸 N-Desmethyl Topotecan
溴芬酸鈉3’-甲氧基芹菜苷;柯伊利素-7-O-葡萄糖-2-O-... Topotecan Carboxylic Acid Sodium Salt
溴芬酸鈉(標準品)3β,7β,12β-三羥基-11,15-二羰基-羊毛甾... Topotecan
鹽酸氟哌噻噸3β,7β,15β-三羥基-11-羰基-羊毛甾烷-8-... 15-keto Fluprostenol isopropyl ester
鹽酸氟哌噻噸3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-(標... Trazodone-d6 Hydrochloride
茶多酚;綠茶提取物4'-去甲鬼臼素 Trazodone N-Oxide
茶多酚;綠茶提取物4'-去甲氧基表鬼臼素(標準品) 4'-Hydroxy Trazodone HCl
茶多酚;綠茶提取物4-β-D-葡萄糖基-1,3,7-三羥基呫噸酮 Varenicline Hydrochloride Labeled 15N3
四氫姜黃素 4-甲基傘形酮-β-D-木糖苷 Varenicline Lactam
四氫姜黃素 4-羥基喹唑啉 Hydroxy Varenicline
管花苷A(標準品)4-硝基兒茶酚(標準品) N-Formyl Varenicline
2’-乙酰基毛蕊花糖苷(標準品)4’-O-甲基補骨脂查爾酮B Varenicline N-Glucoside
2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙基溴 4β-羥基黃芪紫檀烷苷(標準品) Varenicline Carbamoyl β-D-Glucuronide
2-[2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯氧基]乙基溴 5,7,4'-三羥基-8-甲基二氫黃酮(標準品) Deacetyl Vinorelbine
吡咯喹啉醌;QQ5,7-二羥基色原酮 Vinorelbine ditartrate salt hydrate
偶發(fā)分枝桿菌探針法PCR熒光定量試劑盒緊密連接蛋白1(TJP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)D-海藻糖二水 質量規(guī)格:BS
誘導型一氧化氮合酶(NOS2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)20 x PBS緩沖液 質量規(guī)格:AR
層粘連蛋白(LN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 質量規(guī)格:>99%,BR
Endoglin蛋白(ENG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)5 x蛋白質加樣緩沖液 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
雄激素受體(AR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸胍 質量規(guī)格:BS
阿黑皮素原(POMC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸胍 質量規(guī)格:BS,用于生物學染色
還原酶(GR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)側金盞花,阿東糖,核糖 質量規(guī)格:AR
內皮素受體A(ETRA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)酵母浸粉;酵母粉 質量規(guī)格:BS