產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
安氏網尾線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Dictyocaulus arnfieldi | EY00P8882 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
N-叔丁氧羰基-L-焦芐酯3-甲基-N-[4(-三氟甲基)苯基]異惡唑-4-甲酰... Nebivolol hydrochloride
2,3-二氟溴芐3-甲基黃酮-8-羧酸(標準品) Nebivolol hydrochloride
2-氯-3-甲氧基苯3-甲酰SV(標準品) Nuclear fast red
3,4-二甲氧基苯乙酮3-奎寧(標準品) Carmine
4-環己基3-乙氧基-4-羥基苯甲(標準品) Bromophenol red
4-溴-3-氟苯甲酸乙酯3-吲哚甲酸(標準品) Ponceau 2R
2-氨甲基-4-(4-氟芐基)嗎啉3,5-二氨基-6-氯吡-2-羧酸甲酯(標準品) Rose bengal
芴甲氧甲酰基-D-天冬氨酸Β叔丁酯4-N-去甲基(標準品) Azophloxine
3-甲基-1-苯基吡唑4-[2-(5-甲基吡-2-甲酰氨基)乙基]苯磺酰... Eosin Y ,alcohol solution
1,2,3,4-四氫苯并[b]氮雜卓-5-酮4-[2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰)-乙基]-苯磺... Eosin B
7-甲基靛紅4-甲氨基(標準品) Fast Garnet GBC Salt
4-溴-2-氟芐4-羥基(標準品) Fast Red 3 GL Salt
9-苯基-9H-咔唑-3-酸哪酯4-羥基芐;對羥基苯甲(標準品) Fast Red KL Salt
咪唑[1,2-a]吡啶-2-4-羥基間苯二甲酸(標準品) Fast Red B Salt
5-羥基-3-甲基吲哚4-異丁基苯甲酸(標準品) Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt
安氏網尾線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒核糖核酸酶H(RNASEH)(酶聯免疫吸附試驗法)非那西丁 質量規格:>99%,BR100ml
脫氧核糖核酸酶Ⅰ樣2(DNASE1L2)(酶聯免疫吸附試驗法)非那西丁(標準品) 質量規格:>98%,BR6次/盒
酮酸激酶(PK)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸芬戈莫德 質量規格:>90%,BS6次/盒
白細胞特異性轉錄因子1(LST1)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸芬戈莫德 質量規格:>98%,BR500 ml
髓細胞觸發受體1(TREM1)(酶聯免疫吸附試驗法)鹽酸芬戈莫德(標準品) 質量規格:>99.5%,分子生物學級1ml(500X)
窖蛋白(CAV1)(酶聯免疫吸附試驗法)氟芬那酸,氟滅酸 質量規格:>99.5%,厚度0.1-0.2cm500 ml
Ⅰ型膠原α2(COL1α2)(酶聯免疫吸附試驗法)氟芬那酸,氟滅酸 質量規格:>97%,BR3×1ml
α1-微球蛋白(α1M)(酶聯免疫吸附試驗法)氟芬那酸,氟滅酸(標準品) 質量規格:>99%,BR1ml(500X)