產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
支原體探針法PCR熒光定量試劑盒 | Mycoplasma arginini | EY00P9140 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
蘿卜硫素;萊菔硫烷(標準品)濱蒿內酯(標準品) Aminoalbendazole Sulfone
甲鈷檳榔(標準品) Cerivastatin Lactone
甲鈷檳榔花(標準品) Desmethyl Cerivastatin, Sodium Salt
右旋氨丁三波棱瓜子(標準品) Hydroxy Cerivastatin Sodium Salt
右旋氨丁三波棱酮 Desmethyl Hydroxy Cerivastatin Sodium Salt
右旋氨丁三博落回(標準品) Desmethyl Cerivastatin-O-β-D-glucuronide
右旋氨丁三(標準品)薄荷(標準品) Cetirizine Methyl Ester
溴酚蘭,溴二甲藍 補骨脂(標準品) Cetirizine Amide
溴酚蘭,溴二甲藍 補骨脂定(標準品) (R)-Cetirizine N-Oxide
植物凝膠(Sigma)補骨脂二氫黃酮;補骨脂甲素(標準品) tert-Butyl Cetirizine
右旋補骨脂二氫黃酮甲(標準品) rac Cetirizine N-Oxide(Mixture of Diastereomers)
右旋補骨脂酚(標準品) (3S,5R) Fluvastatin Sodium Salt
二苯基碳酰二肼(二苯基脲)補骨脂寧;補骨脂異黃酮(標準品) (3R,5S)-Fluvastatin Sodium Salt
5-磺基水楊酸補骨脂素(標準品) Fluvastatin
1-氨基-2-萘酚-4-磺酸布渣葉(標準品) Clinafloxacin Hydrochloride
支原體探針法PCR熒光定量試劑盒Ⅰ型膠原α1(COL1α1)(酶聯免疫吸附試驗法)dTTP溶液 質量規格:>98%,細胞可滲透的PPARδ激動劑
Ⅺ型膠原α1(COL11α1)(酶聯免疫吸附試驗法)月桂酰基肌氨酸鈉(分子生物學級) 質量規格:JP;722~764μg/mg
透明質酸結合蛋白2(HABP2)(酶聯免疫吸附試驗法)LB Lennox 肉湯培養基 質量規格:USP,干品含量>600 µg/mg
癌胚抗原相關細胞粘附分子7(CEACAM7)(酶聯免疫吸附試驗法)DNA Ladder-H1-K, 即用型 質量規格:含量測定
纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)(酶聯免疫吸附試驗法)蝸牛酶 質量規格:>98%,BR
脂解激活脂蛋白受體(LSR)(酶聯免疫吸附試驗法)蝸牛酶 質量規格:>97%,BR
蛋白酶8(PRSS8)(酶聯免疫吸附試驗法)福林酚 質量規格:AR
橋粒芯膠粘蛋白1(DSC1)(酶聯免疫吸附試驗法)硫酸鎳六水 質量規格:AR