公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
鼠舌黏膜鱗癌細胞;Rca-T | 貼壁生長 | EY-X63700 |
細胞名稱 鼠舌黏膜鱗癌細胞;Rca-T
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Harmalidine
CAS No.:109794-97-0
中文名:
分子式:C16H18N2O
楊梅素 訂購|咨詢 腦肽(ENK) 規格: HPLC≥98%;20mg
橄欖苦苷 訂購|咨詢 腦肽酶(NEP) 規格: HPLC≥98%;20mg
烏美司 訂購|咨詢 腦肽酶(NEP) 規格: 20mg
苷G 訂購|咨詢 腦肽酶2(NEP2) 規格: 20mg
紫莖女貞苷C(95%) 訂購|咨詢 腦蛋白44(BRP44) 規格: 10mg
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戈米辛G 訂購|咨詢 腦源性神經營養因子(BDNF) 規格: 10mg
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5羥基7,8二氧基黃 訂購|咨詢 腦源性神經營養因子(BDNF) 規格: 10mg
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加蘭他敏 訂購|咨詢 腦源性神經營養因子(BDNF) 規格: 20mg
絡塞維 訂購|咨詢 腦源性神經營養因子(BDNF) 規格: 20mg
光翠雀 訂購|咨詢 腦源性神經營養因子(BDNF) 規格: 20mg
3去氫松苓 訂購|咨詢 腦膜瘤基因1(MN1) 規格: 5mg
GNAO1/G0 Protein alpha G蛋白偶聯受體結合蛋白O亞基A2抗體 現貨供應 0.2ml Cefuroxime axetil
LPAP 淋巴細胞蛋酶相關蛋白抗體 現貨供應 0.1ml Cefuroxime axetil
PMA/Prostate Mucin Antigen 前列腺粘蛋白抗原抗體 現貨供應 0.2ml Penicillin G, potassium salt
SEMA4D/CD100 臂板蛋白4D抗體 現貨供應 0.2ml Penicillin G, potassium salt
p47phox NADPH氧酶活蛋白p47抗體 現貨供應 0.2ml Erdosteine
Ankyrin B/Ankyrin brain 錨定蛋白B抗體 現貨供應 0.2ml Jatrorrhizine hydrochloride
FOXN1 叉頭蛋白N1抗體 現貨供應 0.2ml D(+)Galactosamine hydrochloride
Pol II/RNA polymerase II RNA聚合酶II抗體 現貨供應 0.2ml Dioscin
銻塊 進口、國產 英文名稱:Antimony 含量:特純
天狼星玫紅BB 進口、國產 英文名稱:SiriusRoseBB 含量:高純,98%
天青A 進口、國產 英文名稱:AzureII 含量:高純,99%
天青B 進口、國產 英文名稱:AzureB 含量:高純,90%
天青石蘭 進口、國產 英文名稱:CelestineblueB 含量:高純,70%
天然維生素E 進口、國產 英文名稱:VE 含量:顯色劑
甜菜素 進口、國產 英文名稱:Betaine 含量:USP級,98%
甜 進口、國產 英文名稱:Dulcitol 含量:高純,98%
甜菊糖甙 進口、國產 英文名稱:Stevioside 含量:BR,98%
鐵傳遞蛋白 進口、國產 英文名稱:TRF 含量:BR,700U/mg
鼠舌黏膜鱗癌細胞;Rca-T化十六基*銨瓊脂規格:250g用途:用于綠膿桿菌的選擇性分離培養
哥倫比亞血瓊脂平板(9cm)規格:5個/包用途:用于營養要求高細菌的分離、培養和溶血試驗
抗生素5號規格:250g用途:用于檢定菌種培養
TCBS瓊脂規格:250g用途:用于致病性弧菌的選擇性分離(GB、SN標準)
大豆-酪蛋白消化物培養基規格:250g用途:用于藥品無菌檢測
放線菌培養基(改良高氏1號)規格:250g用途:用于放線菌的分離培養
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。