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產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>纖維肉瘤細胞系;JH-2
 
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產品名稱:
纖維肉瘤細胞系;JH-2
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  纖維肉瘤細胞系;JH-2的詳細資料:

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

纖維肉瘤細胞系;JH-2

貼壁生長

EY-X63698

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細胞名稱  纖維肉瘤細胞系;JH-2
形態特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

傳代情況: C10

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Clausine Z

CAS No.:866111-14-0

中文名:

分子式:C13H9NO3

當歸 訂購|咨詢  胸腎表達趨因子(BRAK) 規格: HPLC≥98%;20mg

BMS188797 訂購|咨詢  胸腎表達趨因子(BRAK) 規格: HPLC≥98%;20mg

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MICB  MHC I類鏈相關蛋白B    現貨供應 0.1ml Enoxaparin sodium

TAPA1/CD81  CD81抗體    現貨供應 0.1ml Trimebutine maleate

HAND2  心臟和神經嵴衍生蛋白2抗體    現貨供應 0.1ml Heparin sodium

MYF5  生肌決定因子Myf5抗體    現貨供應 0.1ml HEβCD

SCC112/PIG54  細胞增殖誘導蛋白54抗體    現貨供應 0.1ml Nefopam HCl

EBNA1/EBV Nuclear Antigen  EB病核抗原1抗體    現貨供應 0.2ml Methotrexate disodium

βsynuclein/SNCB  核突觸蛋白β抗體    現貨供應 0.2ml Methotrexate disodium

KDEL (ER Marker)  賴,天冬,谷,亮相關序列抗體    現貨供應 0.2ml Sarafloxacin HCl

碳鋰  進口、國產  英文名稱:LithiumCarbonate  含量:AR,10000目,99%

 進口、國產  英文名稱:Sodiumcarbonateanhydrous  含量:AR,99%

碳鎳  進口、國產  英文名稱:Nickel(II)carbonatebasictetrahydrate  含量:AR,99%

碳銫  進口、國產  英文名稱:Cesiumcarbonate  含量:BR,97%

碳鈰(Ⅲ)  進口、國產  英文名稱:Ceriumcarbonatehydrate  含量:5N

碳脫水酶(牛紅血球)  進口、國產  英文名稱:Carbonicanhydrase(Bovineerythrocytes)  含量:BR,98%

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碳亞脲  進口、國產  英文名稱:Guanidinecarbonate  含量:CP,99%

碳亞錳  進口、國產  英文名稱:Manganouscarbonate  含量:色固

碳緩沖液  進口、國產  英文名稱:CarbonateBuffersolution  含量:蛋白生物學
纖維肉瘤細胞系;JH-2胰胨-亞硫鹽-環絲氨瓊脂基礎規格:250g用途:用于產氣莢膜梭菌的平板計數(GB標準)

1%TTC溶液規格:5支/盒用途:每支添加于100mlHB0268中

Kovacs氏靛基質試劑盒規格:5ml*2用途:用于吲哚(靛基質)試驗

遠藤氏瓊脂規格:250g用途:用于濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。

美藍(亞甲基藍)規格:25g用途:炭疽桿菌檢測用配套試劑

李氏菌增菌肉湯(LB2)規格:9ml*20支/包用途:用于李氏菌二步增菌

產品相關關鍵字: 纖維肉瘤細胞系 JH-2
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