細胞名稱 肺成纖維細胞;HFL1
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性:
培養條件: F12K優質胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況: P(10+5)
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產品名稱 | 肺成纖維細胞;HFL1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63495 |
產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
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rmIGFBP-3, CF (25 UG)細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。籆HOHu164SCF17 DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
rmIGFBP-2, CF (25 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBR96 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIGFBP-1, CF (25 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBRP3-12 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-g, CF (100 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBR96 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-g R1/Fc, CF (100 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB8H7A RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-g Biot Aff Pur PAb (50 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB4G12-13 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-g Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB1R10F11 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-g (100 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB12R13D7 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-b, CF (100000 UN)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB11R2F8 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-b (100000 UN)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-28A RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-a4 (100000 UN)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-75A RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-a13 (100000 UN)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBRP3-17 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-a11 (100000 UN)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HB2G10 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-a1 (100000 UN)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-63D RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-a/b R1, CF (50 UG)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-35B RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
rmIFN-a A (100000 UN)細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HBBADCPPF1-151K RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
肺成纖維細胞;HFL1人富組蛋白(histatin5)ELISA試劑盒NOELISAKit產品規格:48T/96T。
人顆粒溶素(granulysin)ELISA試劑盒NOELISAKit產品規格:48T/96T。
人抗菌肽(Attacin)ELISA試劑盒NONELISAKit產品規格:48T/96T。
人殺菌肽(cecropin)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。
人神經元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。
人美洲商陸素(PWM)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。
人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒NOSELISAKit產品規格:48T/96T。
人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒NPELISAKit產品規格:48T/96T。