公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2 | 貼壁生長 | EY-X63888 |
細胞名稱 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雌性大額牛的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
?
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
巨蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 外周血淋巴細胞;8E5形態特性: 淋巴母細胞樣Megalin
蝸牛同源物2檢測試劑盒細胞名稱: 人胚腎細胞;293T形態特性: 上皮樣snail homolog 2
蝸牛同源物1檢測試劑盒細胞名稱: 人肺鱗癌細胞;SK-MES-1形態特性: 上皮細胞樣snail homolog 1
拓撲異構酶Ⅱa檢測試劑盒細胞名稱: 人非小細胞肺癌細胞;NCI-H1299形態特性: 上皮細胞樣Topoisomerase Ⅱa
17β羥基類固醇脫氫酶4檢測試劑盒細胞名稱: 人外周血慢性髓性白血病細胞;KU812E形態特性: 髓樣17 beta hydroxy steroid dehydrogenase 4
γ-谷氨?;D氨酶7檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌細胞;Calu-3形態特性: 上皮細胞樣gamma glutamyl transpeptidase 7
C-Mer原癌基因酪氨激酶檢測試劑盒細胞名稱: 人自然殺傷細胞;NK-92形態特性: 淋巴母細胞樣C-Mer Proto Oncogene Tyrosine Kinase
1-磷鞘胺醇受體1檢測試劑盒細胞名稱: 人胰腺上皮樣癌細胞;PANC-1形態特性: 上皮細胞樣Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1
1-磷鞘胺醇受體2檢測試劑盒細胞名稱: 人胰腺癌細胞;MIAPaCa-2形態特性: 上皮細胞樣Sphingosine 1 Phosphate Receptor 2
1-磷鞘胺醇受體3檢測試劑盒細胞名稱: 人原胚腎轉化細胞;Trex-293形態特性: 上皮樣;多角Sphingosine 1 Phosphate Receptor 3
白細胞蛋白酶3檢測試劑盒細胞名稱: 人肝癌細胞;PLC/PRF/5形態特性: 上皮細胞樣Proteinase-3
延胡索水化酶, 線粒體檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌細胞;NCI-H441形態特性: 上皮細胞樣Fumarate hydratase, mitochondrial
磷化血管內皮生長因子受體1檢測試劑盒細胞名稱: 人脛骨肉瘤細胞;U-2OS形態特性: 上皮細胞樣phospho-Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1
不透光相關蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人舌鱗狀癌細胞;CAL27形態特性: 上皮細胞樣Opacity-associatedproteins
含纈酪肽蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人骨肉瘤細胞;HOS形態特性: 上皮細胞樣valosin-containing protein
抗麥膠蛋白;麥醇溶蛋白IGA抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人胰腺腫瘤細胞;AsPC-1形態特性: 上皮細胞樣anti-gliadin IgA antibody
粒細胞特異性抗核抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人胰腺導管腺癌細胞;CFPAC-1形態特性: 上皮細胞樣granulocyte specific anti-nuclear antibody
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2地榆皂苷II35286-59-0英文名:Ziyuglycoside II
英文別名:(3beta)-3-(alpha-L-Arabinopyranosyloxy)-19-hydroxyurs-12-en-28-oic acid;Zigu-glucoside II
CAS登錄號:35286-59-0
分子式:C35H56O8
分子量:604.81
分子結構:
外觀:白色晶體
規格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:冬青科植物冬青(I. pubescens Hook. et Arn.)
溶解性:可溶于、DMSO等溶劑,不溶于。
藥理藥效:具有一定的酪氨酶抑制作用,保肝利膽效果。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。