產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
猴病毒0探針法PCR熒光定量試劑盒 | Simian Virus 40(SV40)40 | EY00P9357 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
(標準品)石墨 D50<400nm,99.95%Human F5(Coagulation Factor V/Plasma Factor V) ELISA Kit
左羥哌(標準品)石墨 99.95%,8000目Human F13B(Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit
左羥哌鐿 99.9%,塊狀Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit
左羥哌鐿粉 99.9%Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit
左羥哌茜素紅 AR,≥80.0%(HPLC)Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit
乙氧苯柳(標準品)茜素黃GG INDHuman GSTα5(Glutathione S Transferase Alpha 5) ELISA Kit
鹽酸布替萘芬(標準品)茜素黃R ARHuman Hepc(Hepcidin) ELISA Kit
(標準品)堿藍6B INDHuman GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit
天青I Biological stainHuman GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit
天青I 94%Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit
(標準品)天青Ⅱ Biological stainHuman F13(Coagulation Factor XIII) ELISA Kit
鹽酸司他斯汀(標準品)天青Ⅱ ARHuman Grb10(Growth Factor Receptor Bound Protein 10) ELISA Kit
(標準品)鋁試劑 ARHuman F5(Coagulation Factor V/Plasma Factor V) ELISA Kit
(標準品)酸性鉻藍K ARHuman Grb2(Growth Factor Receptor Bound Protein 2) ELISA Kit
托芬那酸(標準品)對氨基-N,N-二乙基苯硫酸鹽 AR,98%Human F13B(Coagulation Factor XIII B Polypeptide) ELISA Kit
猴病毒0探針法PCR熒光定量試劑盒Rab親和蛋白3A(RPH3A)(酶聯免疫吸附試驗法)苯 (色譜級) 質量規格:含量測定
R-脊椎蛋白2(RSPO2)(酶聯免疫吸附試驗法)乙酸丁酯(色譜級) 質量規格:>94%,BR
Sacsin蛋白(SACS)(酶聯免疫吸附試驗法)乙酸丁酯(色譜級) 質量規格:含量測定
組合因子1(SERINC1)(酶聯免疫吸附試驗法)乙酸丁酯(色譜級) 質量規格:含量測定
特異性蛋白1(Sp1)(酶聯免疫吸附試驗法)環己烷(色譜級) 質量規格:供檢查用
Cytospin B蛋白(CYTSB)(酶聯免疫吸附試驗法)環己烷(色譜級) 質量規格:含量測定
睪素1(TIC1)(酶聯免疫吸附試驗法)環己烷(色譜級) 質量規格:>98%,BR
睪素2(TIC2)(酶聯免疫吸附試驗法)環己烷(色譜級) 質量規格:含量測定