產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
駱駝源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9547 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
NTB (Naltriben)3-己基噻吩 98%Human TOM70 ELISA Kit
N末端腦鈉肽前體1-甲基環(huán)戊 99%Human TMOD3 ELISA Kit
NubO(68-75),亞復(fù)合體4(68-75)2-甲基-4- 99%Human GNB3(Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-3) ELISA Kit
核輸出信號,NES,Dok - 1 (348 – 359)5-降烯-2-羧酸甲酯 96%Human MCHR2(Melanin-concentRating hormone receptor 2) ELISA Kit
核輸出信號NES,PKI甲基鋁氧烷 10 wt.% (1.5M) in tolueneHuman TOM70 ELISA Kit
肥胖抑制素,人1-甲基環(huán)己 96% Human GNB3(Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-3) ELISA Kit
八面神經(jīng)肽3-甲氧基噻吩 98%Human TOMM6 ELISA Kit
阿片受體拮抗劑2-甲氧基噻吩 99%Human TOMM34 ELISA Kit
食欲素A,牛,人,大鼠,小鼠甲基納迪克酸酐 95%Human MT ELISA Kit
食欲素B,犬甲基納迪克酸酐 工業(yè)級(tech)Human TOMM7 ELISA Kit
食欲素B,人降烯二酸酐 99%Human TOP3A ELISA Kit
食欲素B,大鼠,小鼠1,3-雙(二苯基膦烷)二氯化鎳 99%Human TNS1 ELISA Kit
8,尾加壓素Ⅱ,人5-降烯-2- 99%Human TNIP2 ELISA Kit
孤啡肽RQ(孤菲肽)5-降冰烯-2-基乙酸酯(內(nèi)型和外型的混合物) 98%Human TNIP1 ELISA Kit
骨鈣素(1-49),人2-硝基芴 99%Human TNS3 ELISA Kit
駱駝源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒多核糖核苷酸核苷轉(zhuǎn)移酶1(PNPT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-(叔丁氧羰基氧亞氨基)-2-苯乙(99%) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
帶粘蛋白(ZAN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-(叔丁氧羰基氧亞氨基)-2-苯乙(99%) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
合子阻滯基因1(ZAR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,2-苯二乙() 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
海藻糖酶(TREH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,2-苯二乙() 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
脫氧尿苷三磷酸酶(DUT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,2-苯二乙() 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級
Neurensin 1蛋白(NRSN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-溴-1,3,5-三異基苯(96.0 %) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Neurensin 2蛋白(NRSN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-溴-1,3,5-三異基苯(96.0 %) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
玻璃體蛋白(VIT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)2-溴-1,3,5-三異基苯(96.0 %) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BS