細胞名稱 胃腺癌細胞;AGS
形態特性: 上皮細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 細胞株源自一個未經治療的切除腫瘤碎塊。在培養基中植板率為34%。支原體感染后消除。
培養條件: F12K胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產品名稱 | 胃腺癌細胞;AGS |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63528 |
產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
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Serratia rubidaea (Stapp) Ewing et al.細胞名稱: 小鼠胚胎肝細胞;BNLCL.2 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%
Homo sapiens, human細胞名稱: 小鼠成肌細胞;C2C12 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%
Homo sapiens, human細胞名稱: 小鼠皮下結締組織細胞;LWnt-3A DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%;0.4mg/mlG-418
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 小鼠間質細胞;TM3 DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)馬血清,5%;優質胎牛血清,2.5%
Granulibacter bethesdensis Greenberg et al.細胞名稱: 小鼠成纖維細胞;NCTCclone929[Lcell,L-929,derivativeofStrainL] MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)馬血清,10%
Phytophthora alni var. alni細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞;VEROC1008(E6) DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hanse ..細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞(SV40轉化);COS-1[COS1] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 狗腎細胞;SuperTube DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)優質胎牛血清,10%
Homo sapiens, human細胞名稱: 大鼠肝細胞;BRL3A DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%
Trichophyton verrucosum Bodin, anamorph細胞名稱: 雜交瘤(抗CD3);OKT3 IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium優質胎牛血清,20%
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 雞胚成纖維細胞;UMNSAH/DF-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優質胎牛血清,10%
Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細胞名稱: 肺癌細胞株;MSTO-211H RPMI1640(w/oHepes)優質胎牛血清,10%
Desulfitobacterium chlororespirans Sanford ..細胞名稱: 腎母細胞瘤細胞;SK-NEP-1 McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)優質胎牛血清,15%
Homo sapiens, human thymus細胞名稱: 膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1 F12K優質胎牛血清,10%
Homo sapiens, human細胞名稱: 骨肉瘤細胞;MNNG/HOSCl#5[R-1059-D] MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優質胎牛血清,10%
freeze-dried細胞名稱: 纖維肉瘤;HT-1080 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優質胎牛血清,10%
胃腺癌細胞;AGS人*狀腺原氨(T3)ELISA試劑盒PLAUR/uPARELISAkit產品規格:48T/96T。
人17羥孕(17-OHP)ELISA試劑盒PLCELISAKit產品規格:48T/96T。
人雌三醇(E3)ELISA試劑盒PLCγ1ELISAKit產品規格:48T/96T。
人雄烯二(ASD)ELISA試劑盒PLELISAKit產品規格:48T/96T。
人游離睪(F-TESTO)ELISA試劑盒PLELISAKit產品規格:48T/96T。
人睪(T)ELISA試劑盒PLGAELISAKit產品規格:48T/96T。
人脫氫表雄硫酯(DHEA-S)ELISA試劑盒PlgELISAKit產品規格:48T/96T。
人雌二醇(E2)ELISA試劑盒PLGFELISAkit產品規格:48T/96T。