公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
恒河猴腎細胞;MMK3 | 貼壁生長 | EY-X63737 |
細胞名稱 恒河猴腎細胞;MMK3
形態特性: 上皮樣,多角形
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞來源于一雌性獼猴的腎組織。2000年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Kaempferol 3-O-sophoroside
CAS No.:19895-95-5
中文名:酚-3-O-槐糖苷
分子式:C27H30O16
蘇木素 訂購|咨詢 葡萄糖6異構酶(GPI) 規格: HPLC≥98%;20mg
羥基吳茱萸 訂購|咨詢 葡萄糖6脫氫酶(G6PD) 規格: HPLC≥98%;20mg
牛磺鵝去氧膽 訂購|咨詢 葡萄糖6脫氫酶(G6PD) 規格: HPLC≥98%;20mg
次 訂購|咨詢 葡萄糖6脫氫酶(G6PD) 規格: HPLC≥98%;10mg
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訂購|咨詢 葡萄糖6酶催亞基(G6PC) 規格: HPLC≥98%;20mg
獨活素 訂購|咨詢 葡萄糖6酶催亞基(G6PC) 規格: HPLC≥98%;20mg
巴馬亭紅 訂購|咨詢 葡萄糖苷木糖基轉移酶1(GXYLT1) 規格: HPLC≥98%;20mg
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野馬追內酯A 訂購|咨詢 葡萄糖苷酶β(GUSβ) 規格: HPLC≥95%;20mg
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葉黃素 訂購|咨詢 葡萄糖苷酶β(GUSβ) 規格: HPLC≥95%;20mg
蔗糖 訂購|咨詢 葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1) 規格: HPLC≥98%;50mg
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甘草二銨 訂購|咨詢 葡萄糖轉運蛋白10(GLUT10) 規格: UV≥98%;20mg
齊墩果3OβD葡萄糖( 1→3 訂購|咨詢 葡萄糖轉運蛋白11(GLUT11) 規格: HPLC≥98%;5mg
二十八 訂購|咨詢 葡萄糖轉運蛋白12(GLUT12) 規格: HPLC≥98%;20mg
NOC2L NOC2家族樣蛋白抗體 現貨供應 0.2ml Rutin
PSRC1 富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體 現貨供應 0.2ml Rutin
Band3/CD233 紅細胞陰離子交換蛋白1抗體 現貨供應 0.2ml Neosperidin dihydrochalcone
ART4/CD297 二腺苷核糖基轉移酶4抗體 現貨供應 0.2ml Neosperidin dihydrochalcone
B3GALNT1 β1,3半乳糖轉移酶3抗體 現貨供應 0.2ml Oxymatrine
Blood Group Lewis a 血型抗原Lewis A抗體 現貨供應 0.2ml Oxymatrine
Cyclophilin F 親環蛋白(親環素)PPIF抗體 現貨供應 0.2ml Andrographolide
DAP3 死亡相關蛋白3抗體 現貨供應 0.2ml Andrographolide
茚 進口、國產 英文名稱:Acridone 含量:3N,99.9%
熒 進口、國產 英文名稱:Fluorescamine 含量:USP級,98%
熒光紅 進口、國產 英文名稱:Fluorescein 含量:BR,95%
熒光素酶(細菌) 進口、國產 英文名稱:LuciferasefromBacteria 含量:精制級,40u/mg
熒光素酶(螢火蟲) 進口、國產 英文名稱:Luciferasefirefly 含量:BR,200U/mg
熒光指示劑F254 進口、國產 英文名稱:Zincsilicate 含量:SP
螢光素 進口、國產 英文名稱:Fluoresceindisodiumsalt 含量:BR
硬樹脂 進口、國產 英文名稱:Gumcopal 含量:BR,99%
硬脂 進口、國產 英文名稱:Octadecylamine 含量:CP,99.85%
硬脂 進口、國產 英文名稱:1Octadecanol 含量:CP,98%
恒河猴腎細胞;MMK3無菌采樣袋(12cm*18cm)(帶壓條)規格:100個/包用途:用于樣品的采樣(小號采樣袋)
敏感紙片規格:20片用途:炭疽桿菌檢測用配套試劑
吖啶黃素(2.25mg)規格:1ml/支*5用途:每支添加于225ml HB4186中
細菌蛋白胨規格:250g用途:培養基原材料,提供細菌生長所需的生長因子
無機磷細菌培養基規格:250g用途:用于測定磷細菌肥料中磷細菌分解無機磷的效能
WLN培養基規格:250g用途:用于釀造和工業發酵過程中細菌、酵母菌和霉菌培養
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。