細胞名稱 恒河猴腎細胞;RM-1
形態特性: 上皮樣,多角形
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一獼猴的腎組織。1982年由中國醫學科學院昆明醫學生物學研究所建立。
培養條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P6
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
恒河猴腎細胞;RM-1 | 貼壁生長 | EY-X63734 |
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
5,6,7,4'-Tetramethoxyflavone
CAS No.:1168-42-9
中文名:5,6,7,4'-四甲氧基黃
分子式:C19H18O6
型肝炎病表面抗體(AntiHBs) 訂購|咨詢 (VE) 規格: 24支/套
芝林素;Sesamolin 訂購|咨詢 1(VK1) 規格: 20mg
異補骨脂二氫黃;Isobavachin 訂購|咨詢 巢蛋白(NID) 規格: 20mg
異;Isosilybin 訂購|咨詢 巢蛋白2(NID2) 規格: 10mg
芫花素;Genkwanin 訂購|咨詢 巢蛋白2(NID2) 規格: 20mg
;Ephedrine hydr 訂購|咨詢 琥珀受體1(SUR1) 規格: 20mg
香葉;Geraniol 訂購|咨詢 斑聯蛋白(ZYX) 規格: 20mg
辛夷脂素;Fargesin 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體1(CCR1) 規格: 20mg
五味子酯;Schisantherin 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體1(CCR1) 規格: 20mg
β蛻皮激素;Hydroxyecdyso 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體2(CCR2) 規格: 20mg
三尖杉寧;Cephalomannine 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體3(CCR3) 規格: 20mg
穗花杉雙黃;Amentoflavone 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體4(CCR4) 規格: 20mg
人參皂苷Rk3;Ginseside 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體5(CCR5) 規格: 20mg
; 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體6(CCR6) 規格:
10羥基攀援山橙;10Hydrox 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體7(CCR7) 規格: 20mg
羥基A;Hydroxysaff 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體7(CCR7) 規格: 20mg
擬人參皂苷RT5;Pseudoginse 訂購|咨詢 趨因子CC基元受體8(CCR8) 規格: 20mg
絡緦;Rosin 訂購|咨詢 趨因子CC基元配體1(CCL1) 規格: 10mg
SPHK2 鞘激酶2抗體 現貨供應 0.2ml Columbianetin
STK3 絲/蘇蛋白激酶3抗體 現貨供應 0.2ml Eupatilin
IKIP IKK激酶相互作用蛋白抗體 現貨供應 0.2ml Rimonabant carboxylic acid
AMACR/P504S α甲基酰基消旋酶抗體 現貨供應 0.1ml Zeaxanthin
CASC3/MLN51 腫瘤易感候選基因3抗體 現貨供應 0.1ml Triethylenethiophosphoramide
phosphoIKKi/IKKe(Thr500) 核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體 現貨供應 0.1ml Pramipexole Base
TIAF1 TGFB1誘導抗凋亡因子1抗體 現貨供應 0.2ml Pramipexole Base
Cipar1 前列腺雄激素抑制信號蛋白1抗體 現貨供應 0.2ml Genistein
釔 進口、國產 英文名稱:Yttriumoxide 含量:BR,97%
蟻銨 進口、國產 英文名稱:Ammoniumformate 含量:CP,93.5%
蟻鉀 進口、國產 英文名稱:Potassiumformate 含量:BR,95%
異基βD代半乳糖吡喃糖苷 進口、國產 英文名稱:IPTG 含量:BR,98%
異基鋁 進口、國產 英文名稱:Aluminumisopropoxide 含量:BR,89%
異福爾 進口、國產 英文名稱:Isophorone 含量:CP,99%
異檸檬脫氫酶 進口、國產 英文名稱:Isocitratedehydrogenase 含量:BR,30u/ul
異 進口、國產 英文名稱:Sodiumcyanate 含量:CP
異三十 進口、國產 英文名稱:Squalane 含量:AR,97%
異維生素C 進口、國產 英文名稱:DSodiumisoascorbiate 含量:AR,98.5%
恒河猴腎細胞;RM-1支原體半流培養基規格:250g用途:用于支原體的培養
Fraser培養基顆粒規格:250g用途:用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養
輔酶I(NDA)規格:1g用途:進口
沙氏葡萄糖液體培養基規格:250g用途:用于真菌的培養
半胱氨稀釋液規格:250g用途:用途:用于制備樣品時的稀釋液。
品紅亞硫鈉瓊脂規格:250g用途:用于飲用水,水源水中總大腸菌群的選擇性分離和確證(GB標準)
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
SV40T轉化的人胚腎細胞;293T | 貼壁生長 | EY-X63210 |
細胞名稱 SV40T轉化的人胚腎細胞;293T
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 表達SV40大T抗原,可用于轉染和作為包裝細胞;用于瞬時轉染時可高表達AP融合蛋白。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:4~8傳代;26~36小時1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Anti-Apo-E 載脂蛋白E抗體 0.1ml
Anti-APP695/770 淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
Anti-AQP-2 水通道蛋白-2抗體 0.1ml
Anti-AQP-3 水通道蛋白-3抗體 0.1ml
Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗體 0.1ml
Anti-AR 雄激素受體抗體 0.1ml
Anti-ARC ARC抗體 0.2ml
Anti-ARF6 ADP核糖基化因子6抗體 0.2ml
Anti-Aromatase P450 芳香化酶/細胞色素P450/P450抗體 0.1ml
anti-ARIP2a 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體 0.1ml
anti-β-arrestin 1/2 β-抑制蛋白1/2抗體 0.1ml
anti-ARIP2B 激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體 0.2ml
Anti-ART 膠質細胞系源性神經營養因子GDNF的一種抗體 0.1ml
Anti-ARα1 α1腎上腺素能受體抗體 0.1ml
Anti-ASCL1/MASH1 神經母細胞特異性轉移因子抗體 0.1ml
anti-ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗體 0.1ml
anti-ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2 0.1ml
Anti-AT/AGT 血管緊張素原抗體 0.1ml
Anti-AT1R 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 0.2ml
Anti-ATF1 活化復制因子1抗體 0.1ml
Anti-ATF2 活化復制因子2抗體 0.2ml
Anti-ATF3 活化轉錄因子3抗體 0.2ml
Anti-B7-H1/PDL1/CD274 程序性死亡配體1抗體 0.1ml
Anti-B7-H4 B7H4抗體 0.2ml
Anti-BACE/ASP2 β分泌酶抗體 0.1ml
Anti-Bad 相關死亡促進因子Bad抗體 0.1ml
anti-Bak Bcl-2同源拮抗劑Bak抗體 0.1ml
Anti-BADH2 BADH2抗體 0.1ml
人(TP-5)elisa試劑盒 Human Thymopentin, TP-5 Elisa Kit 96T/48T
人(Thymosin)elisa試劑盒 Human Thymosin Elisa Kit 96T/48T
人未磷酸化類胰島素生長因子結合蛋白-1elisa試劑盒 Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 Elisa Kit 96T/48T
人甲狀旁腺激素樣蛋白(PLP)elisa試劑盒 Human parathyroid hormone-like protein, PLP Elisa Kit 96T/48T
人內脂素/內臟脂肪素(visfatin)elisa試劑盒 Human visfatin Elisa Kit 96T/48T
人apelin 12(AP12)ELISA Ki Human apelin 12, AP12 Elisa Kit 96T/48T
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)elisa試劑盒 Human Glucose dependent insulin releasing polypeptide, GIP Elisa Kit 96T/48T
人胰島素原(PI)elisa試劑盒 Human Proinsulin, PI Elisa Kit 96T/48T
人胰島素受體β(ISR-β)elisa試劑盒 Human Insulin Receptor β, ISR-β Elisa Kit 96T/48T
人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)elisa試劑盒 Human Glycated hemoglobin A1c, GHbA1c Elisa Kit 96T/48T
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)elisa試劑盒 Human ghcagons-like pepfide 1, GLP-1 Elisa Kit 96T/48T
人甲狀腺刺激免疫球蛋白(TSI)elisa試劑盒 human thyroid stimulating immunoglobulin, TSI Elisa Kit 96T/48T
人甲狀旁腺激素(PTH)elisa試劑盒 human Parathyroid hormone, PTH Elisa Kit 96T/48T
人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)elisa試劑盒 human Prostaglandin D2-methoxime, PGD2-MOX Elisa Kit 96T/48T
人高敏甲狀腺素(u-T4)elisa試劑盒 human Ultrasensitivity Thyroxine, u-T4 Elisa Kit 96T/48T
SV40T轉化的人胚腎細胞;293T人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)elisa試劑盒 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone, U-TSH Elisa Kit 96T/48T
人多巴胺(DA)elisa試劑盒 human dopamine, DA Elisa Kit 96T/48T
人(AZT)elisa試劑盒 human Azidothymidine, AZT Elisa Kit 96T/48T
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。