產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
虎源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9535 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
LKRApYLG-NH23-乙氧基苯酸 98%Human TXNDC4 ELISA Kit
LL-37,抗菌肽,人2-乙基苯酸 98%Human UBAP1 ELISA Kit
LL - 37 pentamide3-乙氧羰基苯酸頻哪酯 97% Human UBAC2 ELISA Kit
LL – 37,逆次序4-(乙基硫代)苯酸 98%Human UBC ELISA Kit
潛伏膜蛋白1,TDD乙基酸 98%Human TXNDC5(Thioredoxin domain-containing protein 5) ELISA Kit
潛伏膜蛋白1(156-164),IAL二乙酰乙酸乙酯 97%Human UBASH3A ELISA Kit
潛伏膜蛋白2(236-244),RRR5-甲基呋喃-2-酸 97%Human TWF1 ELISA Kit
潛伏膜蛋白2(419-427),TYG4-氟-2-酸 97%Human TWIST1(Twist-related protein 1) ELISA Kit
Locustachykinin I3-氟-4-基苯酸 98%Human TTRAP ELISA Kit
Locustachykinin II2-氟-4-酸 96%Human TWIST2 ELISA Kit
黃體生成素釋放激素,游離酸,人2-氟-5-三氟酸 98%Human TUB ELISA Kit
淋巴細胞激活五肽2-氟-6-甲氧基苯酸 98%Human TTC32 ELISA Kit
Lys-(Ala3)-緩激肽3-氟-4-酸 97%Human TTC39B ELISA Kit
Lys-(Des-Arg9)-緩激肽4-甲酰苯酸 97%Human TTC37 ELISA Kit
Lys-(Des-Arg9,Leu8)-緩激肽4-氟苯酸 99%Human TTC35 ELISA Kit
虎源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒肽酶抑制因子15(PI15)(酶聯免疫吸附試驗法)2-庚酮(分析標準品,≥99.8%(GC)) 質量規格:>97%,工業級
蛋白酶21(PRSS21)(酶聯免疫吸附試驗法)十七烷(分析標準品,≥99.5%(GC)) 質量規格:>99%,BR
蛋白酶7(PRSS7)(酶聯免疫吸附試驗法)十七烷(分析標準品,≥99.5%(GC)) 質量規格:>99%,BR
鞘磷脂合酶2(SGMS2)(酶聯免疫吸附試驗法)三十一烷(Standard for GC≥97.0%(GC)) 質量規格:>70%,BS
色酸羥化酶1(TPH1)(酶聯免疫吸附試驗法)三十一烷(Standard for GC≥97.0%(GC)) 質量規格:BS
色酸羥化酶2(TPH2)(酶聯免疫吸附試驗法)二十六烷(分析標準品, ≥99.5% (GC)) 質量規格:>98%,BR
乙酰乙酰輔酶A合成酶(AACS)(酶聯免疫吸附試驗法)二十六烷(分析標準品, ≥99.5% (GC)) 質量規格:>98%,分子生物學級
3-羥基丁酸脫氫酶1(BDH1)(酶聯免疫吸附試驗法)2-己酮(standard for GC,>99.5%(GC)) 質量規格:>98%,BR