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產品名稱 | 腎透明細胞癌細胞;LoMet-ccRCC |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63957 |
細胞名稱 腎透明細胞癌細胞;LoMet-ccRCC
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C2
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
NADH還原酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;TSCD8α-C16形態特性: 淋巴母細胞樣NADH Dehydrogenase
布魯東氏酪氨激酶檢測試劑盒細胞名稱: 腸癌西妥昔單抗耐藥細胞株;NCI-H508/C225形態特性: 上皮樣Bruton'S Tyrosine Kinase
銅鋅超氧化物歧化酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;DAS5G11E7形態特性: 淋巴母細胞樣extracellulaSuperoxide Dismutase
L-天冬氨氧化酶檢測試劑盒細胞名血清白蛋白的人肝癌細胞系;HepG2N形態特性: 上皮樣L-aspartate oxidase
脫氧核糖核酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;BBBE1H1形態特性: 淋巴母細胞樣Deoxyribonuclease
固氮酶檢測試劑盒細胞名稱: 豬腎上皮細胞;PK15-cyclinAshRNA2形態特性: 上皮樣nitrogenase
條紋花葉病檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;TEAF3F3形態特性: 淋巴母細胞樣BCMV
線條花葉病檢測試劑盒細胞名稱: 豬腎上皮細胞;PK15-cyclinAshRNA1形態特性: 上皮樣Wheat streak mosaic virus
1.6二磷果糖酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;D-IB7IB4形態特性: 淋巴母細胞樣1,6 Fructose Diphosphate
類黃-3',5'-羥化酶檢測試劑盒細胞名稱:細胞性肝癌細胞株;HCC-DJ711形態特性: 上皮樣flavonoid-3’,5’-hydroxylase
4-氨基丁轉氨酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;HF形態特性: 淋巴母細胞樣aminobutyric acid transaminase
α丙氨檢測試劑盒細胞名稱: 癌循環腫瘤細胞;CTC-3形態特性: 上皮樣α-alanine
油菜甾醇檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞;CHO-CaSR形態特性: 淋巴母細胞樣campesterol
油菜醇檢測試劑盒細胞名稱: 倉鼠腎細胞;BHK/BQS24形態特性: 上皮樣Campestanol
咖啡3-O-甲基轉移酶檢測試劑盒細胞名稱: 表達IL2的豬腎上皮細胞;PK15-IL2形態特性: 上皮樣Caffeic acid-3-Omethyltransferase
阿魏-5-羥基化酶檢測試劑盒細胞名稱癌細胞;EC-T形態特性: 上皮樣Ferulate-5-hydroxylase
肉桂酰輔酶A還原酶檢測試劑盒細胞膜癌細胞;EC-G形態特性: 上皮樣cinnamoyl-CoA reductase
腎透明細胞癌細胞;LoMet-ccRCC白樺脂醛13159-28-9英文名:Betulinaldehyde
英文別名:Betulinic aldehyde; Betunal
CAS登錄號:13159-28-9
分子式:C30H48O2
分子量:440.7
分子結構:
外觀:白色果凍狀結晶()
規格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等
提取來源:椏果科(Dilleniaceae)植物大花五椏果DilleniaturbinataFin.etGagn.的干燥葉
熔點:285-287℃
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年