公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小耳豬肺細胞;SEP-L2 | 貼壁生長 | EY-X63758 |
細胞名稱 小耳豬肺細胞;SEP-L2
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雄性小耳豬的肺組織。1988年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Procyanidin B5
CAS No.:12798-57-1
中文名:原花青素B5
分子式:C30H26O12
磺 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶22(ADAM22) 規格: 100mg
雙羥噻 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶28(ADAM28) 規格: 50mg
紅豆蔻 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶33(ADAM33) 規格: 1g
蓮子 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8) 規格: 5g
積雪草 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8) 規格: 1.2g
木犀草苷 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8) 規格: 20mg
胡黃連 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9) 規格: 0.5g
雙羥 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9) 規格: 50mg
抗眼鏡蛇血 訂購|咨詢 解整合素金屬蛋白酶9(ADAM9) 規格:
阿洛林 訂購|咨詢 羧基賴(CML) 規格: 100mg
酒石長春瑞濱 訂購|咨詢 羧肽酶A1(CPA1) 規格: 50mg
4差向金 訂購|咨詢 羧肽酶A2(CPA2) 規格: 50mg
羅漢果苷IV 訂購|咨詢 羧肽酶A3(CPA3) 規格: HPLC≥98%,20mg/支;
Hederacolchiside A1 訂購|咨詢 羧肽酶A3(CPA3) 規格: HPLC≥98%;5mg/支
遼東楤木皂苷V 訂購|咨詢 羧肽酶A3(CPA3) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
秦皮素;秦皮亭;白蠟樹內酯 訂購|咨詢 羧肽酶A4(CPA4) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
辛辣內酯A 訂購|咨詢 羧肽酶A5(CPA5) 規格: 5mg/支
花旗松素;二氫槲皮素;紫杉葉素;黃杉素 訂購|咨詢 羧肽酶A6(CPA6) 規格: HPLC≥98%,20mg/支
VPS4a 液泡分選蛋白4抗體 現貨供應 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, anhydrous
APC5 細胞分裂周期蛋白5抗體 現貨供應 0.2ml Ferrozine
BRD7 鼻咽癌相關轉錄調節蛋白抗體 現貨供應 0.2ml Sodium acetate, trihydrate
BRRN1/CAPH 染色體相關蛋白H抗體 現貨供應 0.2ml Thidiazuron
CDC123/C10orf7 細胞分裂周期蛋白CDC123抗體 現貨供應 0.2ml Iodine
CCDC16/zinc finger protein 830 鋅指蛋白830抗體 現貨供應 0.2ml ADA, Alcohol dehydrogenase
CDC20B 細胞分裂周期蛋白20B抗體 現貨供應 0.2ml Tween80
cb1ip1 周期蛋白B1結合蛋白1抗體 現貨供應 0.2ml Tween80
妥英標準品 規格:250mg 英文名稱:Fosphenytoin Sodium
七氟相關物質C標準品 規格:0.2ml 英文名稱:
卡維地相關物質B標準品 規格:15mg 英文名稱:
標準品 規格:200mg 英文名稱:Cefdinir
牡荊樹提取物標準品 規格:1.5g 英文名稱:Powdered Chaste Tree Extract
相關物質A標準品 規格:50mg 英文名稱:
萘標準品 規格:200mg 英文名稱:Naphthalene
度西汀雜質A標準品 規格:10mg 英文名稱:
扁桃標準品 規格:500mg 英文名稱:Mandelic Acid (AS)
羧甲基淀粉標準品(A型) 規格:400mg 英文名稱:Sodium Starch Glycolate Type A
小耳豬肺細胞;SEP-L2YM11瓊脂規格:250g用途:濾膜法用于霉菌、酵母菌的分離培養
賴氨脫羧酶實驗培養基規格:BR5g詳情介紹
TSA表面接觸皿(6.5cm)規格:10個/包用途:用于環境、器皿、設備和表面的無菌檢測
月桂基硫鹽胰蛋白胨肉湯(LST)顆粒規格:300ml/袋*10用途:用于大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB、SN標準)
波爾頓選擇性增菌肉湯添加劑規格:2ml/支*5用途:每支添加于225ml中HB0273中
柯氏尿素瓊脂規格:250g用途:用于細菌脲酶檢測
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。