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產品名稱:
恒河猴腎細胞;RM-2
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  恒河猴腎細胞;RM-2的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

恒河猴腎細胞;RM-2

貼壁生長

EY-X63770

細胞名稱  恒河猴腎細胞;RM-2
形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一雌性獼猴的腎組織。2004年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P3

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
二氫乳清脫氫酶檢測試劑盒細胞名稱: 人細胞;Hela229[HeLa229]形態特性: 上皮樣Dihydroorotate dehydrogenase

反應蛋白7A域檢測試劑盒細胞名稱: Sars結構蛋白表達株;293001B形態特性: 上皮樣Thrombospondin type-1 domain-containing protein 7A

泛素A52殘留核糖體蛋白融合產物1檢測試劑盒細胞名稱: Sars結構蛋白表達株;293001A形態特性: 上皮樣Ubiquitin A 52 Residue Ribosomal Protein Fusion Product 1

泛素蛋白D檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E形態特性: 上皮樣ubiquitin D

非受體型蛋白酪氨激酶檢測試劑盒細胞名稱: 人細胞;HelaP10s-11F形態特性: 上皮樣NRTK

非酰基化Ghrelin檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3形態特性: 上皮樣UAG

肥大細胞羧肽酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C3T3形態特性: 成纖維細胞樣mast cell carboxypeptidase

肺癌抗原檢測試劑盒細胞名稱: 果子貍腎上皮細胞;Hed68形態特性: 圓形Antigens of lung cancer

肺表面活性物質相關蛋白A2檢測試劑盒細胞名稱: 兔主動脈平滑肌細胞;CCC-SMC-2形態特性: 多角Pulmonary surfatcant-associated protein A2

肺耐藥蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人細胞;HelaS3[HeLaS3]形態特性: 上皮樣Lung resistance-related protein

肺特異性X蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC形態特性: 上皮樣Lung Specific X Protein

父系表達基因10檢測試劑盒細胞名稱: 人T淋巴細胞白血病細胞;HuT78形態特性: 淋巴母細胞樣paternally expressed 10

附睪分泌蛋白4檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠肺腺癌細胞系;LA795形態特性: 上皮樣epididymis protein4

鈣泵檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠淋巴細胞白血病;L1210形態特性: 淋巴母細胞樣Serca

鈣調素;鈣調蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠骨骼肌成肌細胞;L6形態特性: 成肌細胞樣calmodulin

甘露聚糖結合凝集素相關絲氨蛋白酶檢測試劑盒細胞名稱: 人胚胎氣管組織來源細胞;CCC-HBE-2形態特性: mannan binding lectin associated serine protease

肝癌衍生生長因子檢測試劑盒細胞名稱: C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK-形態特性: 成纖維細胞樣hepatoma-derived growth factor
恒河猴腎細胞;RM-2紙片(30ug/片)規格:10片/瓶用途:用于空腸彎曲菌藥敏試驗。

吖啶黃素(2.5mg/支)規格:1ml/支*5用途:每支添加于100mlMFB培養基中

1/4MS培養基(不含瓊脂和蔗糖)規格:250g用途:用于植物的組織培養。

去氧膽鈉規格:100g用途:用于抑制革蘭氏陽性菌的生長

2.5L微需氧產氣包規格:10個/包用途:用于微需氧微生物的培養

OF實驗培養基規格:BR250g詳情介紹
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產品相關關鍵字: 恒河猴腎細胞 RM-2
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