產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細胞名稱 卵巢腺癌細胞;OVCAR-3
形態特性:
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞1982年由T.C.Hamilton等建系,源自一位60卵巢腺癌的腹水,是卵巢癌抗藥性研究的模型。
培養條件: RPMI1640(w/oHepes)20%FBS
傳代方法: 1:2~1:4傳代,每周換液2~3次
傳代情況: P(19+5)
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產品名稱 | 卵巢腺癌細胞;OVCAR-3 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63561 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優,售后齊全。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
人大腸癌單抗雜交瘤;CYL-1拉丁屬名: Pseudomonas putida6-溴吡啶-2-羧酸乙酯Human SNAPC5 ELISA Kit
皰疹病單抗雜交瘤;C5Mcab拉丁屬名: Chitinophaga pinensis2-乙酰基-6-甲氧基吡啶Human SNAPIN ELISA Kit
小鼠雜交瘤;IE6-A2拉丁屬名: Enterococcus faecalis2-乙酰基-6-甲氧基吡啶Human SMPX ELISA Kit
小鼠雜交瘤;2H7拉丁屬名: Beauveria bassiana D-半乳糖烯Human SNCAIP ELISA Kit
小鼠雜交瘤;1F8G5D6D2拉丁屬名: Aspergillus carbonariusD-半乳糖烯Human SMYD4 ELISA Kit
小鼠雜交瘤;3H8H10拉丁屬名: septicum(S)-(+)-扁桃酸甲酯Human SNRPA1 ELISA Kit
小鼠雜交瘤;1C9H6F2C1拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen(S)-(+)-扁桃酸甲酯Human SNAI1(Snail family transcriptional repressor 1) ELISA Kit
小鼠雜交瘤;3B10拉丁屬名: Penicillium urticae Bainier3-氯苯并[b]噻吩-2-甲酸Human SNAI3 ELISA Kit
小鼠雜交瘤;IIID12拉丁屬名: suis3-氯苯并[b]噻吩-2-甲酸Human SNAP23 ELISA Kit
小鼠雜交瘤;1D5H12F1A7用途: 用于抗蟲基因的分離和抗蟲相關基礎研究。二氯[(R)-(+)-2,2′-二(二苯基膦)-1,1′-聯萘基][(1R,2R)-(+)-1,2-二苯基乙二)釕(II)Human SLC7A11(Cystine/glutamate transporter) ELISA Kit
小鼠雜交瘤;1H7G10D10F7注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(1R,2R)-N,N'-雙[3-氧代-2-(2,4,6-三酰)亞丁基]-1,2-二苯基乙二合鈷(II)Human SNAP29 ELISA Kit
小鼠雜交瘤;2B2F1E6G3拉丁屬名: 非無菌藥品 耐膽鹽革蘭陰性菌(陰性)4-氨基-3-苯甲酸Human CALB1(Calbindin) ELISA Kit
小鼠雜交瘤;2C8G10D6F9拉丁屬名: 白酒 乙酸乙酯、己酸乙酯4-氨基-3-苯甲酸Human SMNDC1 ELISA Kit
抗人ORM1-like2單抗雜交瘤;ⅠE3-A10拉丁屬名: Pedobacter roseus2-氨基-5-氟-3-硝基吡啶Human SMARCB1(SWI/SNF-related matrix-associated actin-dependent regulator of chromatin subfamily B member 1) ELISA Kit
抗人Nigo單抗雜交瘤;
卵巢腺癌細胞;OVCAR-3人腺病抗原(ADV-Ag)ELISA試劑盒Smad7ELISAKit產品規格:48T/96T。
人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒SMAFELISAKit產品規格:48T/96T。
人軍團菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒SMELISAKit產品規格:48T/96T。
人輪狀病抗原(RVAg)ELISA試劑盒sMHC-1ELISAKit產品規格:48T/96T。
人血吸蟲(schistosoma)ELISA試劑盒sMHC-1ELISAKit產品規格:48T/96T。
人不耐熱腸素B亞單位(LTB)ELISA試劑盒sMHC-2ELISAKit產品規格:48T/96T。
人冠狀病(CoronavirusesIgG)ELISA試劑盒SmIgELISAKit產品規格:48T/96T。
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒SmIgELISAKit產品規格:48T/96T。