產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
腰果源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9577 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
Z-Ala-Ala-Leu-pNA氯化鉛 AR,99.5%Human SPTBN2 ELISA Kit
Z-D-E-V-D-AMC乙酸鉛(II) ,三水 AR,99.5%Human SSTR5 ELISA Kit
Z-F-R-AMC酸鉛 AR,99.0%Human SPPL2A ELISA Kit
Z-Pro-D-Leu硝酸鎂,六水 AR,99%Human HDAC8(Histone deacetylase 8) ELISA Kit
二氧化硅包四氧化三鐵納米粒子乙酸錳,四水 AR,99.0%Human Sprr2i ELISA Kit
金包γ三氧化二鐵納米粒子試劑汞 AR,99.999% metals basisHuman SPR ELISA Kit
包金納米粒子 CP,99.0%(劇品)Human SRBD1 ELISA Kit
二氧化硅包金納米粒子 AR,98.5%(劇品)Human SPRR3 ELISA Kit
金包四氧化三鐵狀納米粒子β-巰基乙 AR,99.0%(劇品)Human SPRY2 ELISA Kit
二氧化硅包銀納米粒子發(fā)煙硝酸 GRHuman SPRY3 ELISA Kit
四氧化三鐵連30納米金納米粒子焦銻酸 AR,99.0%Human SPATS2L ELISA Kit
銀包金包三氧化二鐵納米粒子焦亞硫酸 AR,95.0%Human SPRY4 ELISA Kit
金包四氧化三鐵納米粒子銻 AR,99.5%Human SPRYD5 ELISA Kit
四氧化三鐵納米粒子銻 CP,99.0%Human MYOG(Myogenin) ELISA Kit
γ-三氧化二鐵納米粒子亞硫酸氫 ARHuman SPTLC2 ELISA Kit
腰果源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒高爾基體蛋白A2(GOLGA2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)石英砂(AR,8-16目或1-2mm) 質(zhì)量規(guī)格:500mg/L,溶劑:1%鹽酸
高爾基體蛋白A3(GOLGA3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)石英砂(AR,8-16目或1-2mm) 質(zhì)量規(guī)格:100μg/mL(20°C),基體:5%HCl
高爾基體蛋白A4(GOLGA4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)石英砂(AR,8-16目或1-2mm) 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,基體:1.0 mol/L 硝酸
高爾基體蛋白A5(GOLGA5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%乙(光譜純) 質(zhì)量規(guī)格:100mg/L(20℃),基體:1%HCl
高爾基體蛋白A6(GOLGA6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)磷酸二氫銨(SP) 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,,基體:1%HNO3
高爾基體蛋白A7(GOLGA7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)二硫化碳(光譜純,≥99.5%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml in 10%HCl
甘油磷酸-O-酰基轉(zhuǎn)移酶(GNPAT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)甲基叔丁基(ACS光譜級,≥99.8%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml
甘酸-N-?;D(zhuǎn)移酶(GLYAT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,4-雙[2-(2-基)乙烯基]苯(99%) 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體: 1%HCl