產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
輕型鏈球菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Streptococcus mitis | EY00P9387 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
?
使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
當歸(標準品)硝酸銠溶液 10 % 溶液Human RAP1A(Ras-related protein Rap-1A) ELISA Kit
延胡索(元胡)(標準品)硝酸銠溶液 5 % 溶液Human RECK(Reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs) ELISA Kit
伊貝母(新疆貝母)(標準品)三氯化釕 水合物 38.0-42.0% Ru basisHuman ROBO4(Roundabout homolog 4) ELISA Kit
蘇合香(標準品)二氯四氨鈀 Pd ≥43.0%Human RSPO1(R-spondin-1) ELISA Kit
蒼術(茅蒼術)(標準品)4-乙酰嗎啉 98%Human WNT4(Protein Wnt-4) ELISA Kit
佛手(標準品)二乙氨基乙 99%Human WNT2B(Protein Wnt-2b) ELISA Kit
何首烏(標準品)N-甲酰嗎啉 99%Human WNT2(Protein Wnt-2) ELISA Kit
羌活(標準品)4-(2-羥乙基)嗎啉 99%Human WWC1(Protein KIBRA) ELISA Kit
枳實(酸橙)(標準品)1-(2-羥乙基)哌啶 99%Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit
關黃柏(標準品)N-甲基嗎啉 GR,99%Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit
蛇膽汁(標準品)N-甲基二乙 99%Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit
首烏藤(標準品)N-甲基嗎啉-N-氧化物 50%水溶液Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit
獨活(標準品)β-巰基乙 生物技術級 (劇品)Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit
三七(標準品)β-巰基乙 AR,99.0%(劇品)Human LYPD3(Ly6/PLAUR domain-containing protein 3) ELISA Kit
干姜(標準品)β-巰基乙 CP,95.0%(劇品)Human MAP1LC3A(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A) ELISA Kit
輕型鏈球菌探針法PCR熒光定量試劑盒紋蛋白3(STRN3)(酶聯免疫吸附試驗法)鎘試劑 質量規格:含量測定
B-黑色素瘤抗原2(BAGE2)(酶聯免疫吸附試驗法)鎘試劑 質量規格:>99%,BR
死亡因子4(MORF4)(酶聯免疫吸附試驗法)鎘試劑 質量規格:含量測定
防御素β126(DEFβ126)(酶聯免疫吸附試驗法)銅鐵試劑 質量規格:HPLC>98%,標準品
鈣黏蛋白26(CDH26)(酶聯免疫吸附試驗法)間甲酚紫 質量規格:>98%,BR
Sideroflexin 5蛋白(SFXN5)(酶聯免疫吸附試驗法)間甲酚紫 質量規格:比色法含量測定
胞漿磷蛋白4(STMN4)(酶聯免疫吸附試驗法)二苯磺酸鈉(AR,IND) 質量規格:含量測定
Sideroflexin 2蛋白(SFXN2)(酶聯免疫吸附試驗法)二苯磺酸鈉(≥97.0% (HPLC)) 質量規格:HPLC法含量測定