細胞名稱 赤狐肺成纖維樣細胞;RF-88L
形態特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雌性赤狐的肺組織。1988年由中國科學院昆明細胞庫建立。赤狐具有B染色體。
培養條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)?
產品名稱 | 赤狐肺成纖維樣細胞;RF-88L |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63782 |
產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
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趨化因子配體17檢測試劑盒細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞;VERO-76形態特性: 上皮樣細胞CXC-chemokine ligand 17
醛脫氫酶1家族成員A1檢測試劑盒細胞名稱: 人肺癌細胞;A549[A-549]形態特性: 上皮樣;多角形Retinal dehydrogenase 1
熱休克70kDa蛋白12B檢測試劑盒細胞名稱: 人胚肺二倍體細胞;KMB-17形態特性: 成纖維細胞樣Heat Shock 70kDa Protein 12B
熱休克蛋白10檢測試劑盒細胞名稱: 人細胞;HelaS3[HeLaS3]形態特性: 上皮樣Heat Shock Protein 10
熱休克蛋白72檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓瘤細胞;Sp2/0-Ag14形態特性: 淋巴母細胞樣;圓形Heat Shock Protein 72
人磷化的H2AX抗體檢測試劑盒細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞;VERO形態特性: 上皮樣細胞S139
特異性β1糖蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 抗丙型肝炎病核心抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株;HCV-C39形態特性: 淋巴母細胞樣Pregnancy Specific β1 Glycoprotein
溶酶體相關膜蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 抗乙型肝炎病表面抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株;HBS-r6形態特性: 淋巴母細胞樣lysosomal-associated membrane protein 2
溶血補體檢測試劑盒細胞名稱: 抗丙型肝炎病NS3抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株;HCVNS3-57形態特性: 淋巴母細胞樣Hemolytic complement
乳清磷核糖轉移酶檢測試劑盒細胞名稱: 抗丙型肝炎病NS5抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株;NS5形態特性: 淋巴母細胞樣orotatephos phoribosyltransferase
狀瘤病抗體檢測試劑盒細胞名稱: 抗丙型肝炎病膜區抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株;HCVEA-246形態特性: 淋巴母細胞樣HPV Antibody
珠蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 抗呼吸道合胞病單克隆抗體雜交瘤細胞株;RSV-4C1形態特性: 淋巴母細胞樣mammaglobin
*氧芐氨嘧啶檢測試劑盒細胞名稱: 抗戍型肝炎病單克隆抗體雜交瘤細胞株;HEV-4形態特性: 淋巴母細胞樣Trimethoprim
殺傷細胞免疫球蛋白樣受體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎細胞;SC-1形態特性: 成纖維細胞樣killer cell immunoglobin-like receptor
沙眼衣原體主要外膜蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929[L929]形態特性: 成纖維細胞樣CTMOMP
上皮膜蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 非洲綠猴腎細胞;CV-1形態特性: 成纖維細胞樣Epithelial membrane protein 2
上皮膜抗原檢測試劑盒細胞名稱: 人非小細胞肺癌細胞;H125形態特性: 上皮樣細胞epithelial membrane antigen
赤狐肺成纖維樣細胞;RF-88LKEA瓊脂(不含糖)規格:250g用途:用于食品、水和其它物質中腸球菌的分離培養和計數
美藍(亞甲基藍)規格:25g用途:炭疽桿菌檢測用配套試劑
雙歧桿菌BS培養基(不含瓊脂)規格:250g用途:用于雙歧桿菌增菌培養
七葉苷(進口)規格:10g用途:微生物指示劑
水楊素(進口)規格:10g用途:微生物指示劑
副結核陽性血清規格:4ml用途:檢驗