綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
根癌土壤桿菌品牌 | Agrobacter | EY-J964029 |
資源名稱: 根癌土壤桿菌
種屬: Agrobacterium tumefaciens
提供形式: 凍干粉
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 植物遺傳工程菌
培養(yǎng)基: LB:酵母膏 5.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 10.0g,蒸餾水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。
生長條件: 28-30℃,好氧,18-24h,
存儲條件: 2-8℃
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
細(xì)胞色素cP4501B1抗體英文全稱SMAD-3英文簡稱SMAD-3 檢測范圍:1352nmol/L-3200pg/mL
細(xì)胞色素cP450 CYP26A1抗體英文全稱MGS英文簡稱mgs 檢測范圍:1353nmol/L-120U/mL
細(xì)胞色素cP450 CYP20A1抗體英文全稱Chlamydia trachomatis igG英文簡稱CT-IgG 檢測范圍:1351nmol/L-
細(xì)胞色素C P450 17A1抗體英文全稱papillomavirus 16 E6 protein antibody英文簡稱HPV16 E6 protein Ab 檢測范圍:1849nmol/L-80ng/mL
細(xì)胞色素B抗體英文全稱Nuclear Receptor Subfamily 3, Group C, Member 1英文簡稱NR3C1 檢測范圍:1657nmol/L-10ng/mL
細(xì)胞色素B還原酶1抗體英文全稱Z-DNA binding protein 1英文簡稱ZBP1 檢測范圍:2071nmol/L-4000pg/mL
細(xì)胞色素b5抗體英文全稱Adenovirus5 antigen英文簡稱ADV-5-Ag 檢測范圍:1528nmol/L-
細(xì)胞色素b5還原酶3抗體英文全稱Myosin-VIIA英文簡稱MYO7A 檢測范圍:1359nmol/L-2000pg/mL
L-Aminoacidoxidase>4U/mg 規(guī)格:BC 環(huán)核苷門控陽離子通道蛋白β3/CNG-β3抗體
Lanthanum(III)acetate,pentahydrate 規(guī)格:>99%,BR 煙型乙酰膽受體α10/AChRα10抗體
L-Canavaninesulfatesalt 規(guī)格:>98%,BR 煙型乙酰膽受體α6/AChRα6抗體
L-Carnitinehydrochloride 規(guī)格:>98%,BR 煙型乙酰膽受體α9/AChRα9抗體
L-CarnitineL-tartrate 規(guī)格:>99%,BR 煙型乙酰膽受體δ/AChRδ抗體
Lead(II)iodide 規(guī)格:>98%,BR 嗜鉻粒蛋白C抗體
Lead(II)stearate 規(guī)格:BR 卡因
Lead(II)sulfate 規(guī)格:>99%,BC 17號染色體開放閱讀框104抗體
Lead(IV)acetate 規(guī)格:>95%,BC 細(xì)胞性受體NK-p46抗體
粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: TN-C ELISA Kit
組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA檢測試劑盒Humanhiston-H2bELISAKit 96T/48T
白介素7受體(IL-7R)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rat Ierleukin-7 receptor,IL-7R ELISA kit
CLIAKitfoGFBeta2(HumanansforminggrowthfactorsBeta2)ELISAKit轉(zhuǎn)化生長因子β2規(guī)格:48T/96T
全組織細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒10次
ELISAKitASO抗鏈球菌溶血素O/抗O規(guī)格:48T/96T
2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔白介素12(IL-12/P70)酶聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit ierleukin 12,IL-12/P70 ELISA kit
ⅩⅢ(FⅩⅢ)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: FⅩⅢ ELISA Kit
RabbitOncostatin-M,OSM酶聯(lián)免疫試劑盒兔抑瘤素M(OSM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanArachidonicAcid,AA酶聯(lián)免疫試劑盒花生四烯(AA)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumancomplemefactorD,CFDELISAKit補(bǔ)體因子D(CFD)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
根癌土壤桿菌品牌軸突相關(guān)CNTP2蛋白抗體(少突膠質(zhì)細(xì)胞)5--8-羥基喹啉Porcine MYH9 (Myosin Heavy Chain 9, Non Muscle) ELISA Kit
酪蛋白激酶δ1抗體5--8-羥基喹啉Porcine MK (Midkine) ELISA Kit
活化白細(xì)胞粘附分子抗體二對甲苯磺拉帕替尼(GW-572016)Porcine CYSLTR1 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 1) ELISA Kit
1號染色體開放閱讀框191抗體2'-甲氧基Porcine TSPAN30 (Tetraspanin 30) ELISA Kit
柯薩奇病A16型聚合酶3DD-(+)-纖維四糖Porcine RANκ (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B) ELISA Kit
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體N,N',N''-三乙酰基殼三糖Porcine GAL9 (Galectin 9 ) ELISA Kit
細(xì)胞角蛋白16抗體1-(4-)鹽鹽Porcine SA (Sialic Acid) ELISA Kit
4號染色體開放閱讀框17抗體甲氧基乙酰Porcine OPN (Osteopontin) ELISA Kit