產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
水牛泰勒蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Theileria buffeli | EY00P9424 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
沙棘(標準品)2-苯氧基苯 99%Human RAP1GDS1(Rap1 GTPase-GDP dissociation stimulator 1) ELISA Kit
紅參蘆(標準品)芐基*基 98%Human PLIN1(Perilipin-1) ELISA Kit
三棱(標準品)芐基*基 99%Human IFNAR1(Interferon alpha/beta receptor 1) ELISA Kit
(標準品)芐基*基氯化銨 98%Human SH3GL1(Endophilin-A2) ELISA Kit
五加皮(標準品)芐基*基氫氧化銨 20%甲溶液Human IKZF1(DNA-binding protein Ikaros) ELISA Kit
羊膽粉(標準品)芐基*基氫氧化銨 25%水溶液Human KRT2(KeRatin, type II cytoskeletal 2 epidermal) ELISA Kit
熊膽粉(標準品)三乙基芐基氯化銨 98%Human OPTC(Opticin) ELISA Kit
西藏棱子芹(標準品)芐基三乙基 98%Human DBH(Dopamine beta-hydroxylase) ELISA Kit
茅膏菜(標準品)18-冠-6 99%Human VNN1(Pantetheinase) ELISA Kit
甘青青蘭(標準品)15-冠-5 97%Human MTDH(Protein LYRIC) ELISA Kit
龍膽(龍膽)(標準品)乙基三苯基化膦 95%Human NANOG(Homeobox protein NANOG) ELISA Kit
母丁香(標準品)甲基三苯基溴化鏻 98%Human MNX1(Motor neuron and pancreas homeobox protein 1) ELISA Kit
蓽澄茄(標準品)四甲基化銨 98%Human OTX2(Homeobox protein OTX2) ELISA Kit
土鱉蟲(地鱉)(標準品)四甲基氫氧化銨 AR,25%水溶液Human PIK3CA(Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform) ELISA Kit
虎杖葉(標準品)四丁基氯化銨 離子色譜級, ≥99.0%Human S1PR1(Sphingosine 1-phosphate receptor 1) ELISA Kit
水牛泰勒蟲探針法PCR熒光定量試劑盒輔肌動蛋白α4(ACTN4)(酶聯免疫吸附試驗法)苯(標準品) 質量規格:>95%,BR
Atrophin 1蛋白(ATN1)(酶聯免疫吸附試驗法)烯標準溶液(標準品) 質量規格:>95%,BR
類固生成因子1(SF1)(酶聯免疫吸附試驗法)磷酸氫二銨 質量規格:>95%,BR
皮層肌動蛋白(CTTN)(酶聯免疫吸附試驗法)717強堿性I型陰離子交換樹脂 質量規格:>95%,BR
斑聯蛋白(ZYX)(酶聯免疫吸附試驗法)732強酸苯乙烯陽離子交換樹脂 質量規格:>95%,BR
輔肌動蛋白α1(ACTN1)(酶聯免疫吸附試驗法)Amberlite?IRA402 強堿型陰離子交換樹脂(氯型) 質量規格:>95%,BR
脫氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEⅡ)(酶聯免疫吸附試驗法)Amberlite?IRA402 強堿型陰離子交換樹脂(氯型) 質量規格:>95%,BR
Pirin蛋白(PIR)(酶聯免疫吸附試驗法)Amberlite XAD-1180N 非離子型多孔樹脂(粒徑0.350 - 0.600 mm) 質量規格:>95%,BR