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產品名稱:
非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975
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非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975相關產品:豬E選擇素ELISA檢測試劑盒說明
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  非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975

貼壁生長

EY-X63405

細胞名稱  非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975
形態特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞是1988年7月從一名女性(無抽煙史)非小細胞肺腺癌組織中分離得到的。

培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3~1:6傳代;每周換液2~3次。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
轉基因小鼠細胞;MMHRL1形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-WISP2 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;1G9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-SDC4 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;1C1形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-HDAC3 Polyclonal Antibody

雜交瘤細胞株;1B6形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-HSD3B2 Polyclonal Antibody

兔正常食管上皮細胞;RNLEC/HL-030RabbitNormalEsophagealEpithelialCellsRNEEC/HL-030形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-AFP Polyclonal Antibody

Aspergillus niger雙(p-甲苯基)氧化磷Human RAB27B(Ras-related protein Rab-27B) ELISA Kit
大鼠垂體瘤-貼壁注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2,3,5-三氟苯甲Human CDH11(Cadherin-11) ELISA Kit
小鼠肉瘤拉丁屬名: Pseudomonas cichorii2,3,5-三氟苯甲Human MUC4(Mucin-4) ELISA Kit
鼠惡性間皮瘤拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiaeN-(2-氨乙基)Human IL15RA(Interleukin-15 receptor subunit alpha) ELISA Kit
垂體瘤拉丁屬名: Bacillus niaciniN-(2-氨乙基)Human Rabenosyn 5 ELISA Kit
雞胚成纖維拉丁屬名: Bacillus subtilisN-(2-氨乙基)Human RABAC1 ELISA Kit
牛腎拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae3,5-二芐氧基苯甲Human GHR(Growth hormone receptor) ELISA Kit
轉入Tet-off調控,含EGFP基因的CHO用途: 產果膠酶3,5-二芐氧基苯甲Human RAB11FIP1 ELISA Kit
牛心內皮用途: 試驗栽培3,5-二芐氧基苯甲Human RABEPK ELISA Kit
貓星形腦膠質用途: 木聚糖酶應用于食品飼料工業乙鎂Human RABEP2 ELISA Kit
豬靜脈內皮拉丁屬名: Streptomyces fradiae乙鎂Human RABEP1 ELISA Kit
草魚腎系拉丁屬名: Arthrobacter tecti三(2-噻吩基)膦

胰腺癌細胞系;BxPC-3M8形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Anti-FTL Chain Monoclonal Antibody
非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H1975兔子脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒HumantrypsinELISAKit產品規格:48T/96T。

兔半胱氨蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒HumanvisfatinELISAKit產品規格:48T/96T。

兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒Humanα-enolaseELISAKit產品規格:48T/96T。

兔吡啶交聯物(PY)ELISA試劑盒Humanα-GlucosidaseELISAKit產品規格:48T/96T。

兔兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒Humanβanti-galactanproteinsIgGELISAKit產品規格:48T/96T。

兔淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒Humanβ-glucosidaseELISAKit產品規格:48T/96T。

兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA試劑盒Humanβ-hexosaminidaseAELISAKit產品規格:48T/96T。

兔子結合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒Humanβ-lactamaseELISAKit產品規格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產品相關關鍵字: 非小細胞肺腺癌細胞 NCI-H1975
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