巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒實驗中操作步驟和結果判斷
巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒實驗中操作步驟和結果判斷
1.取出酶標板,設空白孔,依照次序對應分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫用蒸餾水替代)
2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;
4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
6、巨噬細胞炎性蛋白2Elisa試劑盒重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應用洗滌液后,立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
13、將酶標板置于37℃避光溫育反應15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內進行測定。
16、根據制備的標準曲線計算樣本含量
1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、檢測值范圍:0-400pmol/L
3、敏感度:1.0pmol/L
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