人-細(xì)胞素elisa檢測試劑盒組成及試劑配制
人-細(xì)胞素elisa檢測試劑盒組成及試劑配制
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生wu素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1、酶聯(lián)板:一塊(96孔;48孔)
2、標(biāo)準(zhǔn)品:2瓶
3、樣品稀釋液:1×20ml/瓶
4、生wu素標(biāo)記抗體稀釋液:1×10ml/瓶
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液:1×10ml/瓶
6、生wu素標(biāo)記抗體:1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素:1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液:1×10ml/瓶
9、濃洗滌液:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液:1×10ml/瓶
實驗材料與試劑配制
1、儀器與材料:酶標(biāo)儀(使用前預(yù)熱30分鐘),微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水,濾紙。
2、洗液的配制:按比例配制洗液備用。